酶標(biāo)分析儀的原理及分類

原理

　　酶標(biāo)分析儀本質(zhì)為一臺(tái)變相光電比色計(jì)或分光光度計(jì)，基本工作原理與主要結(jié)構(gòu)和光電比色計(jì)基本相同。光源燈發(fā)出的光波經(jīng)過濾光片或單色器變成一束單色光，進(jìn)入塑料微孔板中的待測(cè)標(biāo)本。該單色光一部分被標(biāo)本吸收，另一部分則透過標(biāo)本照射到光電檢測(cè)器上，光電檢測(cè)器將這些光信號(hào)轉(zhuǎn)換成相應(yīng)的電信號(hào)，電信號(hào)經(jīng)前置放大、對(duì)數(shù)放大、模數(shù)轉(zhuǎn)換等信號(hào)處理后送入微處理器進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和計(jì)算，最后由顯示器和打印機(jī)顯示結(jié)果。微處理機(jī)還通過控制電路控制機(jī)械驅(qū)動(dòng)機(jī)構(gòu)X方向和Y方向的運(yùn)動(dòng)來移動(dòng)微孔板，從而實(shí)現(xiàn)自動(dòng)進(jìn)樣檢測(cè)過程。有些酶標(biāo)分析儀采用手工移動(dòng)微孔板進(jìn)行檢測(cè)，省去了X，Y方向的機(jī)械驅(qū)動(dòng)機(jī)構(gòu)和控制電路，從而使儀器更小巧，結(jié)構(gòu)也更簡(jiǎn)單 。

　　分類

　　按照功能不同酶標(biāo)分析儀可以分為光吸收酶標(biāo)儀，熒光酶標(biāo)儀，化學(xué)發(fā)光酶標(biāo)儀和多功能的酶標(biāo)儀 。

　　1.光吸收酶標(biāo)儀

　　光吸收酶標(biāo)儀是用來進(jìn)行可見光與紫外光吸光度的檢測(cè)。特定波長(zhǎng)的光通過微孔板中的樣品后，光能量被吸收，而被吸收的光能量與樣品的濃度呈一定的比例關(guān)系，由此可以用來定性和定量的檢測(cè)。光吸收的檢測(cè)技術(shù)成熟，成本低，操作簡(jiǎn)單，但是動(dòng)態(tài)范圍窄，靈敏度比較低，特異性不強(qiáng)。一般可見光和紫外光分別采用鎢燈及氘燈作為光源，而紫外/可見酶標(biāo)儀是可以將兩種光源進(jìn)行切換，適應(yīng)不同測(cè)量波長(zhǎng)的需求。

　　2. 熒光酶標(biāo)儀

　　熒光酶標(biāo)儀是用來進(jìn)行熒光的檢測(cè)。通過激發(fā)光柵分光后的特定波長(zhǎng)的光照射到被熒光物質(zhì)標(biāo)定的樣品上后，會(huì)發(fā)出波長(zhǎng)更長(zhǎng)的發(fā)射光，通過發(fā)射光柵后到達(dá)檢測(cè)器。熒光的強(qiáng)度與樣品的濃度呈一定的比例。熒光檢測(cè)靈敏度高，可實(shí)時(shí)檢測(cè)，使用方便，檢測(cè)模式多樣，但是容易受外界干擾，激發(fā)光與發(fā)射光容易互相影響，干擾檢測(cè)。

　　3. 化學(xué)發(fā)光酶標(biāo)儀

　　化學(xué)發(fā)光酶標(biāo)儀是來自生物化學(xué)反應(yīng)中的自發(fā)光，可分為輝光型和閃光型兩種類型。輝光型發(fā)光持久，穩(wěn)定，能持續(xù)一段時(shí)間；閃光型發(fā)光時(shí)間短，變化快，穩(wěn)定性不強(qiáng)，需要應(yīng)用自動(dòng)加樣器才可以進(jìn)行?；瘜W(xué)發(fā)光酶標(biāo)儀靈敏度非常高，動(dòng)力學(xué)范圍廣。

　　4. 多功能酶標(biāo)儀

　　多功能酶標(biāo)儀是以上三種酶標(biāo)儀的集合，集成了兩種或者三種酶標(biāo)儀于一體，可以同時(shí)進(jìn)行光吸收，熒光和化學(xué)發(fā)光的檢測(cè)，功能強(qiáng)大，使用范圍廣，可作為研究平臺(tái)，避免了重復(fù)購(gòu)買，是實(shí)驗(yàn)室的shou選。

　　按照濾光方式的不同酶標(biāo)儀可分為濾光片式酶標(biāo)儀和光柵式酶標(biāo)儀。

　　1.濾光片式酶標(biāo)儀

　　濾光片式酶標(biāo)儀采用濾光片來進(jìn)行波長(zhǎng)的選擇，光源發(fā)出的全波譜光經(jīng)過濾光片后，大部分被過濾，只剩下濾光片本身允許的波長(zhǎng)通過，因此只能截取特定波長(zhǎng)進(jìn)行檢測(cè)。

　　2. 光柵式酶標(biāo)儀

　　光柵式酶標(biāo)儀采用光柵進(jìn)行分光，光源發(fā)出的全波譜光線經(jīng)過光柵后，通過光柵上面分布的一系列狹縫的分光，就可以獲得任意波長(zhǎng)的光，波長(zhǎng)連續(xù)可調(diào)。光柵式酶標(biāo)儀使用方便靈活，可選擇任意波長(zhǎng)的光，也能進(jìn)行全波長(zhǎng)的掃描，通過全波長(zhǎng)掃描可以獲得未知樣品的吸收峰，從而可以達(dá)到檢測(cè)未知樣品的目的。